HILIC色譜柱是親水相互作用色譜柱,其保留模式類似于正相,同時又突破了正相模式的溶劑局限。
分離原理:采用反相流動相體系,而按照正相順序出峰。通過親水性相互作用,可有效的HILIC色譜柱中因保留能力弱而難分離的強極性化合物。
常見的可分離的樣品:糖類,人參皂苷,多肽等在C18柱上保留較差的樣品。
HILIC色譜柱與C18柱的比較
親水相互作用色譜屬于正相色譜。它與反相色譜有著相反的作用方式:親水性低(疏水性強)的化合物將會先被溶出。使用C18柱分析親水性化合物時,一般都要使用離子對試劑。而由于HILIC不需使用任何離子對試劑,所以由離子對試劑引起的平衡時間長,色譜柱劣化加快,流動相調制復雜等諸多問題都將不復存在。另外,HILIC的固定相三唑基具有陰離子交換作用,此作用對酸性化合物有較強的保留能力。
HILIC色譜柱的保存方法
使用之后,應使用體積比為7:3的乙腈和水進行沖洗,清除掉所有的緩沖鹽。
然后,使用100%的異丙醇、以更低的流速進行沖洗,以便貯存。應往回擰緊色譜柱端蓋(擰緊色譜柱端蓋),并將色譜柱放回盒內。
每次分析運行之后,除非第二天要使用,否則建議采用密閉法(按長期保存的方法)清洗色譜柱,然后用異丙醇沖洗。