DikmaPureHPLC離子對試劑的種類和濃度對分離效果都有較大和影響。DikmaPureHPLC離子對試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質。被分離溶質是強酸或強堿,離子對試劑可以是強酸或強堿,弱堿或強酸,弱酸,如被分離的溶質是弱酸或弱堿,則選用的DikmaPureHPLC離子對試劑必須是強堿或強酸。對于溶質結構性質相差較大的混合樣品,離子對試劑種類的選擇并沒有 特殊要求.離子對試劑疏水性的差別可以通過調節離子對試劑濃度和有機溶劑濃度獲得滿意的分離效果.
DikmaPureHPLC離子對試劑的使用
“DikmaPureHPLC離子對試劑不一定是表面活性劑,如己烷和庚烷磺酸鈉,又如三乙胺活四丁基溴化胺,不具表面活性作用。所以用己烷和庚烷鹽就沒有泡末,用四丁基溴化胺也不產生氣泡。十二烷基磺酸鈉(或硫酸鈉),或者十六烷基溴化鈉(CTAB,一種做陰離子用的陽性表面活性劑),在濃度高的時候容易產上泡末。做HPLC時流動相里加的SDS或CTAB濃度一般不會太高,一般在0.1%以下,而且流動相里有甲醇等有機溶劑,高濃度的有機溶劑有破乳的作用,因此,混合后的流動相泡末應該不會很多。另外,做電泳加入的SDS量很大的比如做蛋白質SDS膠,或者毛細管電泳里的MECC,SDS濃度很高,而且沒有或者有很少比例的有機改性劑,當然會有氣泡,跟HPLC不*相同。”
使用DikmaPureHPLC離子對試劑時,調節保留時間的方式與普通反相不同,變化有機相比例沒有改變PH值來得有效。
“當流動相PH值較高時,樣品以中性形式存在,那么正電荷較少,相應的保留較弱;當流動相PH值較低時,樣品便以質子堿H+形式的離子狀態存在,那么正電荷與固定相上帶負電荷的-SO3強烈吸附,相應的保留會非常強。”
“再說明一下B物質的pKa,其值為10.5,在pH為4.5、3.8時都以離子態存在,這點沒錯,雖然都是離子態,都是99%以上,但從量上說還是有點不一樣的。任何物質以離子態存在時都有一個平衡的狀態:B+(H+)==(BH+),這里存在著一個平衡常數K(或者說離解常數),于是pH不同時,H+不同,對應的B、BH+也不同。所以才會出現pH不同,保留值會不同。